ГЕНОМ ГРАНАТА. УЧЕНЫЕ РАСКРЫВАЮТ ТАЙНЫ РУБИНОВЫХ ЗЕРНЫШЕК.
14.09.2018
Источник: Поиск, 14.09.18
Беседовал Зульфугар Фарзалиев
Все
мы с нетерпением ждем осени, чтобы, заглянув на рынок, приобрести сказочно
вкусный плод гранат, основным производителем которого на постсоветском
пространстве остается Азербайджан. А что представляет собой этот фрукт, в
котором каждое зерно вобрало себя тепло щедрого южного солнца? Об этом “Поиску”
рассказывал директор Института генетических ресурсов Национальной академии наук
Азербайджана, член-корреспондент Зейнал АКПЕРОВ.
-
Вот уже несколько лет наш институт изучает культуру граната на молекулярном
уровне. Работы ведутся по “дорожной карте” научно-исследовательской программы,
которую финансирует Президиум НАНА. Гранат выбран как объект исследований
потому, что земля Азербайджана - центр происхождения и культивирования этой
культуры. Выращиваемые здесь многочисленные сорта граната и получаемые из них
продукты давно занимают достойное место на мировом рынке. Гранат - один из
национальных символов нашей страны, он присутствует в большинстве азербайджанских
легенд, отражен в личных именах и географических названиях.
Первоначально
с помощью GPS мы выявили ареал распространения местных сортов народной селекции,
затем впервые с использованием технологий молекулярных маркеров изучили генетическое
разнообразие 85 сортов плода на основе межмикросателлитных (ISSR) локусов.
Полученные результаты на молекулярном уровне подтвердили широкое разнообразие
этой культуры и дали возможность определить степень генетического родства
изученных сортов. Результаты работ отражены в статье, опубликованной в журнале “Генетика”
Российской академии наук.
Кроме
того, наш институт провел геномные исследования в рамках пилотного проекта
республиканского Фонда развития науки. Для этого была организована лаборатория
геномики, которую оснастили секвенатором нового поколения, что позволило более
тщательно подходить к анализу неточных, противоречивых данных, а также
создавать новые ДНК-маркеры, охватывающие весь геном. По сути, мы получили
бόльшие, чем имели ранее, возможности для анализа транскриптома, а также
проведения исследований в области филогенетики и экологии. То есть смогли
предоставить более точные данные по эволюции этой культуры и ее развитию в
течение нескольких тысячелетий.
Базой
для таких работ послужили исследования на уровне генома, которые у нас в
институте были проведены на злаковых культурах: пшенице, ржи и их диких
сородичах. Мы успешно на основе секвенирования (GBS) завершили генотипирование
700 образцов пшеницы и ржи, хранящихся в Национальном генетическом банке
Азербайджана. Переход от анализа GBS к более сложному этапу - прочтению всего
генома (секвенирование de-novo) - а также анализу транскриптома впервые был
осуществлен на культуре граната.
Так,
при координации исследований нашего Института генетических ресурсов совместно с
учеными Австралии, России, США и Египта впервые в мировой практике был прочитан
геном de-novo у сорта граната “Азербайджан гюлейшеси” и созданы
транскрипционные (РНК) профили его органов: корня, стеблей (молодых и старых),
листьев, цветов и зерен. Впервые геном (ДНК) граната длиною 1,5 миллиарда пар
нуклеотидов был полностью расшифрован, выявлены нуклеотидные повторы генома и
транскриптома. Также был проведен анализ экспрессии генов, то есть преобразование
информации от гена в функциональный продукт (РНК или ДНК), в различных органах.
Насколько
это сложная работа? Судите сами: при проведении первичных анализов изучения генома
граната были идентифицированы 51 160 генов, входящих в 5485 семейств. Впервые
проведен сравнительный анализ белок-кодирующих генов граната с такими
культурами, как персик, эвкалипт и виноград, и установлено отличие генома
граната от сравниваемых культур по 26 303 генам и 549 семействам генов. В
геноме граната выявлены разновидности микросателлитной ДНК и их общее число,
установлено, что по всему геному были распределены 23 455 моно-, 47 593 ди-, 15
868 три-, 3202 тетра-, 899 пента-, 648 гекса-микросателлитов. Обнаруженные
микросателлиты могут служить маркерами для изучения биоразнообразия граната во
всем мире. Дальнейшее исследование с использованием полученных данных о геноме
позволит дать точное представление о происхождении этой культуры.
После
того как в нашем институте впервые была определена интенсивность экспрессии
генов шести органов граната, мы обнаружили бόльшую активность генов тканей
корней по сравнению с другими органами. В молодых и сравнительно старых стеблях
схожесть интенсивности экспрессии по сравнению с другими органами
свидетельствует о достоверности проведенных исследований.
В
декабре 2017 года сведения о геноме граната были зарегистрированы в
Национальном центре биотехнологической информации Соединенных Штатов Америки
(NCBI). Результаты, полученные по геному и транскприптому, были обсуждены
совместно с учеными США, России, Австралии и Египта, и началась подготовка
статьи о подробностях исследования. В то же время для продолжения исследований
граната, сравнительного генотипирования дикого и культурного разнообразия этого
фрукта на основе однонуклеотидного полиморфизма как наиболее распространенного,
эволюционно стабильного и точного маркера необходима финансовая поддержка этих
работ. Для изучения живучести сортов граната, устойчивости к болезням и
вредителям, для проведения широкомасштабных исследований по ассоциативному
картированию количественных и качественных характеристик этого уникального растения
нужны средства соответствующих министерств, международных фондов и
бизнес-структур. Сотрудничество с ними имеет решающее значение для
стратегических интересов страны.